Что такое серологическое исследование

Серология

Серология – это наука посвященная изучению сыворотки крови человека и ее свойств. В современной медицине серология – это один из разделов иммунологии, уделяющий пристальное внимание взаимодействию антител и антигенов в сыворотке крови человека. Различают два вида серологических реакций по механизму действия:

Косвенная или трехкомпонентная реакция: реакция нейтрализации или торможения гемагглютинации

Прямая или двухкомпонентная реакция: реакцию агглютинации и пассивной гемагглютинации

Серологические реакции используются в диагностической и научной практике. Благодаря им стало возможно определение группы крови, переливание крови и плазмы, определение специфичности белка, контроль эффективности вакцинации и многое другое.

Серологическое исследование направлено на выявление проверяемого антитела в крови пациента. Нормой при серологическом анализе является нулевое содержание проверяемого антитела, что отрицает наличие того, или иного инфекционного заболевания.

Стоимость серологического анализа крови

Как подготовится к серологическому анализу крови?

Так как для серологического анализа требуется забор венозной крови, то подготовка к его сдачи носит классические рекомендации для забора крови. Для правильного серологического анализа нужно придерживаться следующих правил:

Записаться на серологическое исследование

Где пройти серологическое исследование в Москве?

В многопрофильном медицинском центре «ДокторСтолет» вы всегда можете пройти серологическое исследование. Наш медицинский центр расположен между станциями метро «Коньково» и «Беляево» (ЮЗАО г. Москвы в районе станций метро «Беляево», «Коньково», Тёплый Стан», «Чертаново», «Ясенево», «Севастопольская», «Новые Черёмушки» и «Профсоюзная»). Здесь Вас ждет высококвалифицированный персонал и самое современное диагностическое оборудование. Приятно удивят наших клиентов и вполне демократичные цены.

Источник

Серологический анализ

Общие сведения

Как известно, кровь является одной из важнейших, жизнеобеспечивающих тканей организма (подробнее см. «Клинический анализ крови» и «Анемия. Кровь и бескровие» ). В отличие от абсолютного большинства тканей (не считая лимфы), кровь текуча и подвижна; под действием насосной функции сердца она непрерывно циркулирует в сложно ветвящейся системе сосудов различного калибра (от магистральных артерий и крупнейших венозных коллекторов до мельчайших капилляров), обеспечивая перфузию, – «пропитывание», «проливание сквозь», – всех прочих тканей и органов. С током крови транспортируются питательные вещества, связанный гемоглобином кислород, иммунные факторы, витамины, гормоны и т.д.

Весьма и весьма сложным является также состав крови. Сухая фракция представлена форменными элементами – тремя основными группами клеток (эритроциты, лейкоциты, тромбоциты), на каждую из которых природой возложены строго определенные функции. Удельная доля сухой фракции у взрослых составляет 40-50% общего объема циркулирующей крови. Жидкая фракция, или плазма крови, на 90% состоит из воды; в оставшихся 10% растворено множество органических и неорганических соединений. К числу таких компонентов относится и продуцируемый печенью белок фибриноген, – важный промежуточный фактор системы свертывания крови.

Следует также отметить, что состав появляющихся в крови антител строго специфичен для каждого типа антигенов; эта особенность позволяет, непосредственно не наблюдая собственно антиген (вирусы, например, слишком малы для оптического микроскопа) и не осаждая его биохимическими реактивами, все же достаточно уверенно судить о том факторе, на который среагировала иммунная система.

Определения терминов

Антиген – любое чужеродное, явно или потенциально вредоносное вещество, микроорганизм, клетка и т.п.

Антитело – средство биохимической контратаки, специфические протеины, вырабатываемые иммунной системой в ответ на появление распознанного антигена.

Плазма – жидкая фракция крови, несущая весь ее состав, за исключением форменных элементов (эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов).

Сыворотка – плазма крови, из которой удален фибриноген.

Латинское название сыворотки – serum. Отсюда происходят такие, в частности, названия, как серозная оболочка, серозная жидкость, серотип (серовар), а также серология и серологический анализ.

Серология – научная дисциплина на стыке гематологии и иммунологии, занимающаяся изучением свойств сыворотки крови и разработкой методов практического применения этих свойств в целях диагностики, профилактики и лечения.

Серологическое исследование (серологический анализ) – обширная группа методов лабораторной диагностики, общим принципом которых является выявление специфических антител в сыворотке крови.

Методы

Процедура

Материалом для серологического анализа является небольшое количество крови, отбираемой натощак общеизвестными способами, которые в просторечье именуется «кровь из пальца» или «кровь из вены».

Область применения

На данный момент серологический анализ (в различных его модификациях) является основным и наиболее распространенным методом лабораторной диагностики. Логично предположить, что главной областью применения должна быть клиника инфекционных болезней. Действительно, методы количественного и качественного анализа антител/антигенов в сыворотке крови давно стали золотым стандартом индивидуальной, скрининговой, эпидемиологической диагностики заболеваний, вызываемых патогенными микроорганизмами. Однако фактическая область применения значительно шире: этот же подход используется в судебно-медицинской экспертизе, эндокринологии, фармакологии, иммунологии (в частности, для оценки эффективности вакцин и других препаратов), для установления группы крови, в диагностике аутоиммунных расстройств и т.д.

Преимущества и недостатки

К достоинствам практически всех методов серодиагностики и сероидентификации относятся достаточно высокие скорость и чувствительность в сочетании с приемлемой стоимостью исследования. Основной недостаток заключается в том, что этот подход является все-таки косвенным, подтверждающим (в отличие, скажем, от культуральных или генетических исследований, идентифицирующих патоген как таковой): необходимо хотя бы предполагать, какой или какие антигены в каждом конкретном случае наиболее вероятны (то есть какие тестовые наборы должны применяться), – иначе круг поиска неоправданно расширяется. Кроме того, серологическое исследование в некоторых случаях может давать ложноположительные результаты, например, если обследуемый перенес инфекцию в прошлом и в крови остались иммунные антитела.

Источник

Что такое серологическое исследование

Что такое серологические исследования, для чего они проводятся, каковы основные методы серологической диагностики?

Серологические исследования — это методы изучения антигенов или антител в биологическом материале больных, основанные на определенных реакциях иммунитета. Обнаружение в биологическом материале антител к возбудителю инфекции или антигенов позволяет установить причину заболевания.

Серологические исследования не обладают 100% специфичностью и чувствительностью при диагностике инфекционных заболеваний. Поэтому оценивать их результаты нужно с учетом клинической картины заболевания. Этим обусловлена необходимость использования для диагностики инфекции нескольких тестов, а также применение методов Western-blot, подтверждающих результаты скрининговых методов.

«Иммуноблоттинг (Вестерн-блот, Western-blot) является фактически конечным верификационным (подтверждающим) методом в цепи иммунологических исследований, которые позволяют сделать окончательное лабораторное заключение. Особенно важный данный тест для подтверждения или опровержения инфекционного заболевания (например, коклющ, боррелиоз и т.д.). Метод Вестрен-блота, как правило, необходим после обнаружения положительных антител класса IgG инфекционного процесса, т.к. именно в такой комбинации происходит более правильная лабораторная интерпретация результатов и дальнейшая тактика лечения пациента. Для постановки Вестерн-блота используют специальные нитроцеллюлозные полоски, на которые методом горизонтального и затем вертикального иммунофореза перенесены белки в порядке нарастания молекулярного веса. Антитела сыворотки пациента взаимодействует с белками в определенных зонах полоски, а дальше происходит ход реакции аналогичный иммуноферметному анализу (ИФА)»,— объясняет к.мед.наук, медицинский директор лаборатории СИНЭВО Украина, Оксана Владиславовна Небыльцова.

Биологический материал, используемый для серологического исследования

Для диагностики каких состояний используются серологические исследования

Целью серологических исследований является установление эффективности проведенного лечения после выздоровления пациента, а также обнаружение рецидива заболевания. Кроме того, серологические методы могут выявить такие заболевания как:

Основные методы, используемые в серологической диагностике

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ, метод Кунса)

Прямой: микробы или антигены тканей или микробы обрабатваются специальными сыворотками с антителами, а также меченными флюорохромами, которые светятся в УФ-лучах. Бактерии, таким образом, светятся в виде каймы зеленого цвета по периферии клетки. Наблюдается в люминисцентном микроскопе.

Непрямой: мазки обрабатываются антителами антимикробной кроличьей сыворотки. Затем антитела, которые не связались с антигенами микробов, отмываются. Таким образом, выявляются оставшиеся на микробах антитела. В итоге, образуется комплекс микроб + антикроличьи антитела + антимикробные кроличьи антитела, помеченные флюорохромом. Этот комплекс наблюдается в люминесцентном микроскопе.

Для оценки результатов существует четырёхбалльная шкала, которая характеризуется интенсивностью поверхностного жёлто-зелёного свечения клеток антигенов:

+ очень слабое свечение клетки

++ слабое свечение периферии клетки

+++/++++ яркое свечение клетки

Титром реакции считается разведение сыворотки с результатом результат реакции +++ или ++++.

Реакция непрямой гемагглютинации (РНГ)

Реакция пассивной или непрямой гемагглютинации используется при диагностике инфекций, вызванных простейшими, бактериями и риккетсиями.

Результаты оценивают по характеру осадка эритроцитов:

++++ резко интенсивная реакция

Положительным считается результат реакции с интенсивной реакцией +++ или резко интенсивной реакцией ++++, при которых эритроциты покрывают все дно пробирки.

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Применяется анализ для диагностики широкого круга инфекций, в том числе:

Результаты новых исследований, опубликованных в International Journal of Obesity, говорят, что пища, употребляемая на завтрак, программирует метаболизм человека на весь последующий день.

Антиген или антитело фиксируется на твёрдых планшетах, затем, с помощью ферментной метки выявляются комплексы антиген – антитело.

ИФА имеет ряд преимуществ перед остальными серологическими методами. Реакция наиболее чувствительная, а в тестах используются универсальные реагенты. Анализ отличается быстротой, возможностью исследования иммуноглобулинов различных классов. В настоящее время ИФА является одним из основных методов лабораторной диагностики.

Оценка результатов ИФА проводится автоматически с помощью специальных приборов. В некоторых случаях также допускается и визуальный учёт результатов реакции. Достоверность серологической диагностики зависит от организации лабораторного контроля, состоящего из нескольких процедур, предназначенных для оценки качества результатов.

Сеть медицинских центров «Клиника современных технологий» в Хабаровске предоставляет широкий спектр профессиональных медицинских услуг в различных областях, среди которых: кардиология, гастроэнтерология, офтальмология, гинекология, урология и многие другие. Многопрофильный центр «КСТ» имеет всю необходимую сертификацию, дружелюбную атмосферу, а так же новейшее оборудование и опытных профессионалов которые помогут вам по доступным ценам в Хабаровске. Обращайтесь к нам оставив заявку на сайте или позвоните нам по телефону +7 (4212) 48-88-88

Наши специалисты

Штат «Клиники современных технологий» сформирован из опытных специалистов. Диагностика и лечение проводятся врачами, работающими в таких направлениях, как хирургия, неврология, урология, педиатрия, эндокринология, кардиология и т. д. Несмотря на высокий уровень профессионализма, наши сотрудники продолжают шлифовать свои навыки и знания, регулярно повышают квалификацию. Доверьте своё здоровье опытным врачам!

В «Клинике современных технологий» очень внимательно относятся к формированию штата. У нас работают настоящие профессионалы, которые всегда готовы оказать помощь пациентам. Они смогут найти подход как к взрослому человеку, так и к ребёнку. Точная диагностика, грамотное лечение, успешная реабилитация − всё это возможно при обращении в «Клинику современных технологий». Мы стоим на страже вашего здоровья.

Источник

Серологические и иммунологические исследования

Серологические реакции (реакции «антиген-антитело») применяются для определения антигенов групп крови, в диагностике заболеваний, в судебной медицине для идентификации тканевых, микробных антигенов.

Серологические реакции:
реакции агглютинации
реакции преципитации
реакции нейтрализации
реакции с участием комплемента
реакции с использованием меченых антител или антигенов
— реакция агглютинации хорошо выявляет lgM-антитела, но менее чувствительна для определения lgG-антител.
— реакции связывания комплемента и гемолиза, которые требуют участия комплемента, не выявляют lgA-антитела и lgE-антитела.

Различают:
прямые реакции агглютинации, используемые для выявления антител в сыворотке крови больного.
Реакция агглютинации бактерий с использованием соответствующей антибактериальной сыворотки относится к наиболее простым серологическим реакциям. Взвесь бактерий добавляют к различным разведениям испытуемой сыворотки крови и через определенное время контакта при t°37° регистрируют, при каком наивысшем разведении сыворотки крови происходит агглютинация. Реакцию агглютинации бактерий используют для диагностики многих инфекционных заболеваний: бруцеллеза, туляремии, брюшного тифа и паратифов, бациллярной дизентерии, сыпного тифа.

Реакции агглютинации для определения группы крови и резус-фактора основаны на взаимодействии аллоантител (изоантител) и антигенов эритроцитов. Для их обнаружения используют реакцию Кумбса, основанную на выявлении неполных антител с помощью антиглобулиновых сывороток.

К эритроцитам известной специфичности добавляют исследуемую сыворотку крови, антиглобулиновую сыворотку против lgG (непрямая реакция Кумбса). Fab-фрагменты неполных антител исследуемой сыворотки крови присоединяются к эритроцитам, а к свободным Fc-фрагментам этих антител присоединяются антитела против lgG, и происходит агглютинация эритроцитов.

реакция пассивной, или непрямой гемагглютинации основана на использовании эритроцитов с адсорбированными на их поверхности антигенами, взаимодействие которых с соответствующими антителами сыворотки крови больных приводит к образованию фестончатого осадка. Используется для определения беременности, выявления повышенной чувствительности больных к лекарственным препаратам и гормонам;
В реакции пассивной (непрямой), гемагглютинации (РПГА, РНГА) используют эритроциты или нейтральные синтетические материалы (например, частицы латекса), на поверхности которых сорбированы антигены (бактериальные, вирусные, тканевые) или антитела. Их агглютинация происходит при добавлении соответствующих сывороток или антигенов. Эритроциты, сенсибилизированные антигенами, называют антигенным эритроцитарным диагностикумом и используют для выявления и титрования антител.

Эритроциты, сенсибилизированные антителами. называют иммуноглобулиновыми эритроцитарными диагностикумами и применяют для выявления антигенов.

Реакцию пассивной гемагглютинации используют для диагностики заболеваний, вызванных бактериями (брюшной тиф и паратифы, дизентерия, бруцеллез, чума, холера и др.), простейшими (малярия) и вирусами (грипп, аденовирусные инфекции, вирусный гепатит В, корь, клещевой энцефалит, крымская геморрагическая лихорадка и др.), а также для определения некоторых гормонов, выявления повышенной чувствительности больного к лекарственным препаратам и гормонам, например пенициллину и инсулину.

реакция торможения гемагглютинации основана на способности антител иммунной сыворотки нейтрализовать вирусы, которые в результате теряют свойство склеивать эритроциты. Используется для диагностики вирусных болезней;
Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) основана на феномене предотвращения (торможении) иммунной сыворотки гемагглютинации эритроцитов вирусами, используется для выявления и титрования противовирусных антител. Она служит основным методом серодиагностики гриппа, кори, краснухи, эпидемического паротита, клещевого энцефалита и других вирусных инфекций, возбудители которых обладают гемагглютинирующими свойствами. например, для серодиагностики клещевого энцефалита в лунки панели разливают двукратные разведения сыворотки больного на щелочном боратном буферном растворе. Затем добавляют определенное количество, обычно 8 АЕ (агглютинирующих единиц), антигена клещевого энцефалита и после 18 ч экспозиции при t°4° вносят взвесь гусиных эритроцитов, приготовленную на кислом фосфатно-буферном растворе. Если в сыворотке крови больного есть антитела к вирусу клещевого энцефалита, то антиген нейтрализуется и агглютинация эритроцитов не происходит

реакция коагглютинации — разновидность реакции агглютинации, в которой антигены возбудителя определяют с помощью стафилококков, предварительно обработанных иммунной диагностической сывороткой.
Реакции преципитации.

Преципитация происходит в результате взаимодействия антител с растворимыми антигенами. Простейшим примером реакции преципитации является образование в пробирке непрозрачной полосы преципитации на границе наслоения антигена на антитело. Широко применяют различные разновидности реакции преципитации в полужидких гелях агара или агарозы (метод двойной иммунодиффузии по Оухтерлоню, метод радиальной иммунодиффузии, иммуноэлетрофорез), которые носят одновременно качественный и количественный характер.

В результате свободной диффузии в геле антигенов и антител в зоне оптимального их соотношения образуются специфические комплексы — полосы преципитации, которые выявляют визуально или при окрашивании. Особенностью метода является то, что каждая пара антиген — антитело формирует индивидуальную полосу преципитации, и реакция не зависит от наличия в исследуемой системе других антигенов и антител

Реакция связывания комплемента (РСК) основаны на способности субкомпонента комплемента Clq и затем других компонентов комплемента присоединяться к иммунным комплексам, позволяют титровать антигены или антитела по степени фиксации комплемента комплексом антиген — антитело. Эта реакция состоит из двух фаз: взаимодействия антигена с испытуемой сывороткой крови (исследуемая система) и взаимодействия гемолитической сыворотки с эритроцитами (индикаторная система). При положительной реакции в исследуемой системе происходит связывание комплемента, и тогда при добавлении сенсибилизированных антителами эритроцитов гемолиза не наблюдается. Реакцию применяют для серодиагностики сифилиса (реакция Вассермана), вирусных и бактериальных инфекций.

Иммунное прилипание. Эритроциты, тромбоциты и другие клетки крови имеют на поверхности рецепторы к третьему компоненту комплемента (СЗ). Если к антигену (бактериям, вирусам и др.) добавить соответствующую иммунную сыворотку и комплемент, то образуется комплекс антиген — антитело, покрытый СЗ-компонентом комплемента. Эту реакцию применяют при изучении ряда вирусных инфекций (клещевого энцефалита, денге), которые сопровождаются иммунопатологическими процессами и циркуляцией в крови вирусных антигенов в комплексе с антителами.

Реакция нейтрализации основана на способности антител нейтрализовать некоторые специфические функции макромолекулярных или растворимых антигенов, например активность ферментов, токсины бактерий, болезнетворность вирусов. В бактериологии эту реакцию используют для обнаружения антистрептолизинов, антистрептокиназы и антистафилолизинов. Реакцию нейтрализации токсинов можно оценивать по биологическому эффекту, так, например, титруют антистолбнячные и антиботулинические сыворотки. Смесь токсина с антисывороткой, введенная животным, не вызывает их гибели. Различные варианты реакции нейтрализации применяют в вирусологии. При смешивании вирусов с соответствующей антисывороткой и введении этой смеси животным или в клеточные культуры патогенность вирусов нейтрализуется и при этом животные не заболевают, а клетки культур не подвергаются деструкции.

Реакции с использованием химических и физических меток

Иммунофлюоресценция заключается в использовании меченных флюорохромом антител, точнее, иммуноглобулиновой фракции антител lgG. Меченное флюорохромом антитело образует с антигеном комплекс антиген — антитело, который становится доступным наблюдению под микроскопом в УФ-лучах, возбуждающих свечение флюорохрома. Реакцию прямой иммунофлюоресценции используют для изучения клеточных антигенов, выявления вируса в зараженных клетках и обнаружения бактерий и риккетсий в мазках. На обнаружении антигенов вирусов в клетках отпечатков со слизистой оболочки носа основана экспресс-диагностика гриппа, парагриппа и аденовирусной инфекции.

Более широко применяют метод непрямой иммунофлюоресценции. основанный на выявлении комплекса антиген — антитело с помощью люминесцирующей иммунной сыворотки против lgG-антител и используемой для обнаружения не только антигенов, но и титрования антител. Метод нашел применение в серодиагностике герпеса, цитомегалии, лихорадки Ласса. Препараты с наслоенной исследуемой сывороткой крови помещают в термостат при t° 37° для образования иммунных комплексов, а затем после отмывания несвязавшихся реагентов выявляют эти комплексы меченой люминесцирующей сывороткой против глобулинов человека. Применяя меченые иммунные сыворотки против lgM- или lgG-антител, можно дифференцировать тип антител и обнаруживать ранний иммунный ответ по наличию lgM-антител.

Иммунологические методы исследования основаны на специфическом взаимодействии антигенов и антител. Широко используются для определения групп крови, лабораторной диагностики инфекционных и паразитарных заболеваний, тканевых и опухолевых антигенов, видовой принадлежности белка, распознавания аллергии и аутоиммунных болезней, беременности, гормональных нарушений, в научно-исследовательской работе. Они включают серологические исследования (реакции прямого воздействия антигенов и антител сыворотки крови).

При переливании крови и ее компонентов клинически значимыми являются группы крови по следующим системам:

— система АВ0, включающая антигены А, В;

— система Резус, включающая антиген Резус-принадлежности класса D и антигены эритроцитов С, с, Е, е;

— система Келл, включающая антигены эритроцитов класса К.

Исследование образцов донорской крови для определения групп крови по системам АВ0, Резус-принадлежности, определения фенотипа антигенов эритроцитов по системам Резус и Келл, скрининга антиэритроцитарных аллоантител.

Группа крови по системе АВ0 определяется перед каждым взятием у донора крови или ее компонентов с использованием моноклональных антител специфичности анти-А, анти-В одной серии реактивов;повторное определение группы крови по системе АВ0 проводится из образца донорской крови, взятого во время донации перекрестным способом со стандартными эритроцитами А, В

Резус-принадлежность определяется наличием или отсутствием антигена D, выявляемого при исследовании образца донорской крови, взятого во время донации;Резус-принадлежность устанавливается как положительная при наличии антигена D и как отрицательная при отсутствии антигена D; производится типирование антигенов эритроцитов С, с, Е, е системы Резус;определения антигена эритроцитов К системы Келл;скрининг антиэритроцитарных аллоантител донорской крови;устанавливается специфичность антител к антигенам эритроцитов.

Метод иммунохемилюминесцентного анализа, основанный на выявлении комплекса «антиген-антитело» при взаимодействии антигенов со специфическими антителами для определения маркеров вирусов иммунодефицита человека, гепатитов В и С и возбудителя сифилиса

антитела к эритроцитарным антигенам

гемолитическая болезнь новорожденных

Определение группы крови системы АВО (простая и перекрестная реакция). Определение группы крови системы Резус
Фенотипирование антигенов эритроцитов всех известных систем.
Выявление, определение активности и специфичности аллоиммунных антиэритроцитарных антител классов IgG и IgM.
Определение аутоиммунизации к антигенам эритроцитов. Индивидуальный подбор эритроцитсодержащих компонентов для переливания.
Диагностика иммуноконфликтной беременности и гемолитической болезни новорожденных.
Иммунологические исследования (анализ крови):

Определение антител к вирусу Эпштейна-Барра, IgM
Определение антител к вирусу Эпштейна-Барра, IgG
Определение IgG к капсидному антигену
анализ по капле крови

Источник